DYCP瓊脂糖水平電泳儀操作規(guī)范與維護(hù)要點(diǎn)

更新時間：2025-12-28

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　　實(shí)驗(yàn)室里，一臺DYCP電泳儀正平穩(wěn)運(yùn)行，凝膠上條帶清晰分離——這看似簡單的操作背后，實(shí)則暗藏諸多細(xì)節(jié)。從凝膠濃度的精準(zhǔn)配比，到電泳電壓的毫厘把控，任何一個環(huán)節(jié)的疏忽都可能導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗。本文將拆解DYCP瓊脂糖水平電泳儀的核心操作步驟，手把手教你避開常見誤區(qū)，讓實(shí)驗(yàn)效率與結(jié)果質(zhì)量雙提升。

　　一、設(shè)備檢查與試劑準(zhǔn)備

　　操作前需確認(rèn)DYCP瓊脂糖水平電泳儀主體無裂紋、電極無氧化，緩沖液槽無滲漏，槽蓋與電極接線接觸良好。推薦搭配電源，確保電壓調(diào)節(jié)功能正常。試劑需使用新鮮配制的1×TAE或1×TBE緩沖液，核酸染料需按說明書比例稀釋，避免使用過期或受污染試劑。

　　二、凝膠制備與參數(shù)選擇

　　根據(jù)DNA片段大小選擇瓊脂糖濃度：大片段（>10kb）用0.8%凝膠，中片段（1-10kb）用1.0%-1.2%，小片段（<1kb）用1.5%-2.0%。以DYCP-31DN為例，稱取對應(yīng)質(zhì)量瓊脂糖加入錐形瓶，加入緩沖液后微波爐中高火加熱30秒，搖勻后繼續(xù)加熱20秒至溶液透明無顆粒。冷卻至50-60℃時加入染料，倒入膠室托盤（厚度3-4mm），室溫靜置25-30分鐘至全部凝固。

　　三、上樣與電泳參數(shù)設(shè)置

　　凝膠凝固后，垂直拔出梳子，將膠板放入電泳槽，確保加樣孔靠近負(fù)極。倒入緩沖液至液面沒過凝膠2-3mm，用移液器吸取預(yù)混6×Loading Buffer的樣品，斜角45°對準(zhǔn)加樣孔中心緩慢推液，每孔上樣量建議10-15μL。儀器支持高通量上樣，可按從左到右順序依次加樣，邊緣孔加入DNA Marker作為分子量對照。蓋好槽蓋后連接電極線，開啟電源選擇恒壓模式，電壓設(shè)置為50-70V，電泳時間40-60分鐘，待溴酚藍(lán)遷移至凝膠2/3處時停止。

　　四、結(jié)果觀察與設(shè)備維護(hù)

　　電泳結(jié)束后關(guān)閉電源，取出凝膠置于凝膠成像系統(tǒng)，調(diào)整紫外燈波長至254nm或302nm，拍攝并保存圖像。實(shí)驗(yàn)后需用蒸餾水沖洗電泳槽、膠室托盤和梳子，去除殘留凝膠，晾干后存放于干燥通風(fēng)環(huán)境。定期檢查電極狀態(tài)，若出現(xiàn)氧化生銹，用400目砂紙打磨確保電場均勻穩(wěn)定。